犬疱疹病毒如何诊断?
诊断犬疱疹病毒主要根据临诊症状、临床检查,结合病原学检查和血清学检查。
临床症状
患病犬的临床症状,根据病程可以分为急性型和慢性型。
急性型多见未接种过疫苗,或者疫苗接种史不清。病初体温轻度升高,眼、鼻流浆液性分泌物,结膜充血肿胀,羞明流泪,食欲减退,精神萎蘼,鼻、咽喉部充血肿胀,咽部有大小不等的灰白或黄白色伪膜覆盖,不易剥离,剥脱后可见基底粘膜肿胀、出血。支气管、肺部水肿,黏膜增厚,表面覆有少量黏液性性泡沫。耳壳脐孔内充血红肿,乳头部肿胀,鼻镜干燥、龟裂,有的出现趾间或乳头间溃烂、溃结等,病程一般6天到1周康复。
幼年犬感染后,常伴发支气管肺炎。感染后2-14天,可见明显的呼吸道症状,病初体温升高、呼吸急促、结膜潮红,羞明流泪,流鼻涕和鼻液,可伴有喘鸣、咳嗽、呕吐、腹泻等;鼻腔和喉部黏膜上附有一层薄的褐色伪膜,易被擦去。病犬口腔黏膜呈紫褐色,牙齿附着棕色小疱。
慢性型的患犬多为成年犬,体温不高,食欲减少,精神沉郁,渐进消瘦,足和尾末梢、鼻皮易脱落、龟裂和结痂,鼻部、眼和上呼吸道黏膜上附有褐色、坚硬伪膜,不易剥离。
实验室检查
1、病毒检查
从病犬的病变组织分离病毒是该病的最可靠诊断依据。在急性病例,取病犬的气管、肺部等病变组织,用含5%~10%新生牛血清的MCDB131培养基(美国GIBCO公司产品)在37℃、5%CO2的培养箱中连续培养2~3周,细胞病变明显增大,病变区细胞融合成片,出现细胞脱落、溶解死亡等现象。用病犬的眼角膜、结膜、鼻、肺、肝、肾等病变组织块进行普通琼脂平板培养,37℃、5%CO2的条件下孵育3~7天可产生圆形、凸起、光滑、边缘整齐、中央呈乳白色或微黄色的菌落。
2、病原血清型鉴定
采用HA、ID50或LD50的血清学实验方法,用阳性血清进行干扰试验鉴定血清型。
3、病毒核酸的检测
根据犬疱疹病毒基因组特性,设计不同的引物,采用巢式反应PCR检测犬疱疹病毒。